Análise da atividade fosfolipásica do veneno de serpentes do gênero Bothrops: um estudo comparativo
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Publication type
Academic monograph
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Portuguese
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Abstract
Snake envenomation was reintroduced as a neglected tropical disease by the World Health
Organization (WHO) in 2017 and represents a serious public health problem for tropical and
subtropical regions of developing countries. Species of the genus Bothrops are considered
Category 1 of medical importance by the WHO, accounting for approximately 85% of
snakebites that occur throughout the year in Brazil. Variations in the venom composition of
snakes of the same species can be determined according to genetics, diet, gender,
geographicaldistribution, age or even seasonality. The objective is to investigate the
phospholipase activity comparatively in adult snakes of the species: Bothrops alternatus,
Bothrops atrox, Bothrops jararaca, Bothrops jararacussu, Bothrops leucurus, Bothrops
moojeni, Bothrops neuwiedi and Bothrops pauloensis, as well as the identification of
variations in the enzymatic activity of L - amino acid oxidase and immunoenzymatic
variations of the toxins present in these venoms. Methods of characterization of biochemical
activity and immunorecognition were used: proteindosage by the Bradford method; SDS-
containing polyacrylamide gel electrophoresis; High Performance Liquid Chromatography –
Reverse Phase; phospholipase activity with NOBA substrate; L-amino acid oxidase activity
on L-methionine and Western Blotting. The results show interspecific and intraspecific
differences. In the electrophoresis gel it was possible to observe differences involving
absence, presence and intensity of bands. PLA2 and LAAO activities were notably higher in
males although Balt1 and Bju1 were exceptions, with their phospholipase activity lower than
that of females (Balt2 and Bju2). The commercial Bothrops antivenom produced by the
Butantan Institute presents a good pattern of band recognition forming a profile similar to the
gels, regardless of gender and only in the regions between 37 and 25 kDa there was a lack of
recognition in bands. Although all the chromatograms presenteda very similar profile, it is
noticeable that there was a notable gain in variability, some quantitative differences were
observed in the chromatographic profiles of the venoms studied.
Abstract in Portuguese
O envenenamento por serpentes foi reintroduzido como uma doença tropical negligenciada
pela Organização Mundial da Saúde (OMS) em 2017 e representa um grave problema de
saúde pública para as regiões tropicais e subtropicais de países em desenvolvimento. As
espécies do gênero Bothrops são consideradas Categoria 1 de importância médica pela OMS,
responsáveispor aproximadamente 85% dos acidentes ofídicos que ocorrem ao longo do ano
no Brasil. Variações na composição do veneno das serpentes de uma mesma espécie podem
ser determinadas segundo a genética, a dieta, o gênero, a distribuição geográfica, a idade ou
até mesmo a sazonalidade. Objetivando investigar a atividade fosfolipásica comparativamente
em serpentes adultas das espécies: Bothrops alternatus, Bothrops atrox, Bothrops jararaca,
Bothrops jararacussu, Bothrops leucurus, Bothrops moojeni, Bothrops neuwiedi e Bothrops
pauloensis, assim como perfil da composição proteica e variações imunoenzimáticas das
toxinas presentes nestes venenos, utilizaram-se os métodos de caracterização de atividade
bioquímica e de imunorreconhecimento: dosagem de proteínas pelo método de Bradford;
SDS- PAGE; cromatografia Líquida de Alta Performance – Fase Reversa; atividade
fosfolipásica sobre NOBA; atividade de L-aminoácido oxidase sobre L- metionina e Western
Blotting. Os resultados mostram diferenças interespecíficas e intraespecíficas. No gel de
eletroforese foi possível observar diferenças envolvendo ausência, presença e intensidade de
bandas. As atividades de PLA2 e LAAO foram notavelmente maiores em machos, apesar de
B. alternatus e B. jararacussu terem sido exceções, com sua atividade fosfolipásica menor
que a das fêmeas. O antiveneno botrópico comercial produzido pelo Instituto Butantan
apresenta um bom padrãode reconhecimento de bandas formando um perfil semelhante aos
géis, independente do gêneroe apenas nas regiões entre 37 e 25 kDa houve escassez de
reconhecimento em bandas. Apesar de todos os cromatogramas terem apresentado um perfil
bem semelhante, é perceptível, que houve um notável ganho de variabilidade foram
observadas algumas diferenças quantitativas nos perfis cromatográficos dos venenos
estudados.
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https://repositorio.butantan.gov.br/handle/butantan/5006
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Issue Date
2023
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