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Hemaglutinação como um teste para avaliar a funcionalidade da toxina Tsh (Temperature-Sensitive Hemagglutinin) purificada por gel filtração

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DC FieldValueLanguage
dc.contributorCurso de Especialização em Toxinas de Interesse em Saúdept_BR
dc.contributorLab. Bacteriologiapt_BR
dc.contributor.advisorRuiz, Rita de Cássiapt_BR
dc.contributor.authorMatsumoto, Ana Juliapt_BR
dc.date.accessioned2023-08-29T15:17:49Z-
dc.date.available2023-08-29T15:17:49Z-
dc.date.issued2023pt_BR
dc.date.submitted2023-01-01-
dc.identifier.urihttps://repositorio.butantan.gov.br/handle/butantan/5073-
dc.format.extent48 p.pt_BR
dc.language.isoPortuguesept_BR
dc.rightsRestricted accesspt_BR
dc.titleHemaglutinação como um teste para avaliar a funcionalidade da toxina Tsh (Temperature-Sensitive Hemagglutinin) purificada por gel filtraçãopt_BR
dc.typeAcademic monographpt_BR
dc.subject.keywordserino-protease autotransportadora de Enterobacteriaceae (SPATE)pt_BR
dc.subject.keywordtoxina Tshpt_BR
dc.subject.keywordtoxina Vatpt_BR
dc.subject.keywordhemaglutinaçãopt_BR
dc.subject.keywordEscherichia coli (E. coli)pt_BR
dc.contributor.butantanMatsumoto, Ana Julia|:Aluno|:Curso de Especialização em Toxinas de Interesse em Saúdept_BR
dc.contributor.butantanRuiz, Rita de Cássia|:Pesquisador|:Lab. Bacteriologiapt_BR
dc.identifier.bvsccBR78.1pt_BR
dc.identifier.bvsdbIBProdpt_BR
dc.degree.levelEspecializaçãopt_BR
dc.degree.grantorEscola Superior de Ensino do Instituto Butantanpt_BR
dc.degree.localSão Paulopt_BR
dc.degree.programPrograma de Pós-graduação Lato Sensupt_BR
dc.description.abstractptA exposição ou secreção de proteínas relacionadas a fatores de virulência de bactérias Gram-negativas é dependente de sistemas de transporte altamente especializados. O sistema de secreção tipo V é o responsável pelo transporte das proteínas autotransportadoras membros da família das Serino-Proteases Autotransportadoras de Enterobacteriaceae (SPATE), as quais diversas funções de virulência vêm sendo atribuídas. SPATEs têm sido descritas em bactérias isoladas de infecções gastrointestinais, trato urinário, meningite e sepse. O objetivo deste trabalho foi contribuir com os estudos de caracterização do papel das toxinas da família das serino-proteases autotransportadoras de Enterobacteriaceae Vat, Tsh e Sat na infecção bacteriana avaliando, particularmente, a funcionalidade da Tsh purificada por gel filtração. Inicialmente a cinética de crescimento de E. coli patogênicas das cepas EC120 vat+ ou EC077, EC046, EC153 e EC143 tsh+ foi realizada nos meios TSB, LB, DMEM e DMEM acrescido de 1% de triptona a fim de determinar o melhor meio e tempo de cultivo que favorece a secreção das proteínas autotransportadoras. Para a obtenção da Tsh, a cepa EC143 foi cultivada em meio LB. O sobrenadante do cultivo concentrado foi submetido à coluna de gel filtração e as frações foram analisadas por SDS-PAGE e Westen Blotting. A quantidade de proteína das frações contendo Tsh foi determinada e a avaliação da funcionalidade da toxina foi realizada pelo ensaio de hemaglutinação de eritrócitos de galinha, clássico para avaliar a atividade de Tsh. Paralelamente, Vat e Sat foram também submetidas à hemaglutinação. Os resultados mostraram que a funcionalidade da Tsh purificada por gel filtração é mantida, que Vat não tem capacidade hemaglutinante e que a determinação da capacidade hemaglutinante de Sat necessita de maiores estudos visto que em presença de PMSF (inibidor de serino protease) o resultado foi mantido. Como o PMSF pode estar danificando os eritrócitos, novos ensaios utilizando, por exemplo, anticorpos anti-Sat para neutralizar o efeito serão realizados.pt_BR
item.openairetypeAcademic monograph-
item.fulltextSem Texto completo-
item.grantfulltextnone-
item.languageiso639-1Portuguese-
crisitem.author.dept#PLACEHOLDER_PARENT_METADATA_VALUE#-
crisitem.author.orcid#PLACEHOLDER_PARENT_METADATA_VALUE#-
Appears in Collections:Toxinas de Interesse em Saúde

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