Ação do Amblyomin-X no processo de coagulação sanguínea

A hemostasia é um evento biológico, responsável pela fluidez do sangue nos vasos sanguíneos, composto por elementos relacionados à coagulação, fibrinólise e endotélio. O Amblyomin-X, é uma proteína recombinante caracterizada como inibidor do tipo Kunitz, expressa em sistema procarioto (E. coli) e em sistema eucarioto (P. pastoris) e é capaz de inibir o FXa da coagulação sanguínea. O FXa é uma proteína essencial para o desencadeamento do mecanismo de coagulação uma vez que a sua forma ativa (FXa) provoca a geração de trombina que é responsável pela formação do coágulo de fibrina. Neste estudo, avaliou-se a ação do Amblyomin-X em plasma de humanos e de coelhos. O Amblyomin-X foi injetado (1 mg/kg) pela veia marginal da orelha dos coelhos e amostras de sangue foram coletadas em diferentes tempos (30 min, 2, 4 e 24 horas), e foram submetidos às análises de tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPa) e tempo de protrombina (TP). Em paralelo, sangue humano de doadores sadios foram tratados com Amblyomin-X e submetidos aos mesmos ensaios para plasmas de coelhos. Os resultados mostraram que o Amblyomin-X foi capaz de prolongar o TP e o TTPa, em plasma de coelhos e o TTPa em plasma humano, mas não o TP. Também foi avaliada a cinética enzimática de inibição ocasionada pelo Amblyomin-X, verificou-se que o Amblyomin-X inibiu de forma não competitiva as diferentes enzimas (Plasmina, FXa, Tripsina). O Ki para a Plasmina, FXa e Tripsina foi de 3,8; 2,2 e 3,0 µM respectivamente. Verificou-se também inibição de 55% no complexo tenase e 44%, sobre o FXa, utilizando a mesma concentração de inibidor (3,0 µM). Os resultados sugerem ação anticoagulante ou ainda antitrombótica do Amblyomin-X, que poderá tornar-se um novo candidato para distúrbios hemostáticos.
Keywords
Coagulação;  Inibidor de Fator X ativado;  Amblyomin-X;  Hemostasia;  Expressão Heteróloga;  Coagulation;  Inhibitor of Activated Factor X;  Hemostasis;  Heterologous expression

Other Titles
The action ofAmblyomin-X in the blood clotting process
metadata.dc.contributor
metadata.dc.description.sponsorship
Document type
Thesis
Advisor
Chudzinski-Tavassi, Ana Marisa
Level
Mestrado
Institution
Instituto Butantan
Place
São Paulo
Program
Programa de Pós-Graduação em Ciências – Toxinologia (PPGTOX)
Submission Date
2015
Metrics
Rights
Open Access
URI

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