Anticorpos recombinantes contra as toxinas Stx1 e Stx2 produzidas por Escherichia coli produtora da toxina de Shiga: obtenção e caracterização dessas ferramentas para o imunodiagnóstico e terapia

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dc.contributorPrograma de Pós-Graduação em Ciências – Toxinologia (PPGTox)pt_BR
dc.contributor.advisorPiazza, Roxane Maria Fontespt_BR
dc.contributor.authorLuz, Danielapt_BR
dc.date.accessioned2020-10-09T17:22:33Z-
dc.date.available2020-10-09T17:22:33Z-
dc.date.issued2015pt_BR
dc.date.submitted2015-
dc.identifier.citationLUZ, Daniela. Anticorpos recombinantes contra as toxinas Stx1 e Stx2 produzidas por Escherichia coli produtora da toxina de Shiga: obtenção e caracterização dessas ferramentas para o imunodiagnóstico e terapia. 2015. 144 p. Tese (Doutorado em Ciências - Toxinologia) - Instituto Butantan, São Paulo, 2015.pt_BR
dc.identifier.citationLuz D. Anticorpos recombinantes contra as toxinas Stx1 e Stx2 produzidas por Escherichia coli produtora da toxina de Shiga: obtenção e caracterização dessas ferramentas para o imunodiagnóstico e terapia [Recombinant antibodies against Stx1 and Stx2 toxins: obtainment and characterization of these tools for Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) immunodiagnosis and therapy] [Doctoral dissertation]. São Paulo: Instituto Butantan; 2015. 144 p. Portuguese.pt_BR
dc.identifier.urihttps://repositorio.butantan.gov.br/handle/butantan/3270-
dc.description.abstractShiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) causes hemorrhagic colitis and hemolytic uremic syndrome by producing Shiga toxin (Stx), a AB5 type toxin. The B subunit binds to ganglioside receptors, and the active A subunit is translocated into the cell, where it inhibits protein synthesis by acting on rRNA, leading to cell death. Diagnosis of these strains is not commonly done in the routine laboratory of low-income countries. Besides, therapy for intoxication is based on minimizing the symptoms, since no toxin antidote is available. Thus, the development of effective tools for toxin detection and therapy is highly relevant. Antibodies exhibit excellent high affinity for their specific antigens. To maintain the homogeneity and specificity of monoclonal antibodies, together with largescale production and low cost, genetic engineering has been used to develop recombinant antibodies. These include single chain variable fragments and antigenbinding fragments, which consist of antibody fragments that have antigen recognition regions. In the present study we obtained and characterized two different recombinant antibody fragments (Fab and scFv), produced in bacteria, against Stx toxins from STEC isolates. Furthermore, for the first time a human monovalent fragment was constructed (Fab), which was able to recognize and neutralize Stx toxins. These fragments obtained are promising tools for its use in the diagnosis and therapy of intoxication by STEC.pt_BR
dc.description.sponsorship(FAPESP) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulopt_BR
dc.format.extent144 p.pt_BR
dc.language.isoPortuguesept_BR
dc.rightsOpen accesspt_BR
dc.titleAnticorpos recombinantes contra as toxinas Stx1 e Stx2 produzidas por Escherichia coli produtora da toxina de Shiga: obtenção e caracterização dessas ferramentas para o imunodiagnóstico e terapiapt_BR
dc.title.alternativeRecombinant antibodies against Stx1 and Stx2 toxins: obtainment and characterization of these tools for Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) immunodiagnosis and therapypt_BR
dc.typeDoctoral thesispt_BR
dc.subject.keywordanticorpos recombinantespt_BR
dc.subject.keywordensaios imunossorológicospt_BR
dc.subject.keywordpurificação de proteínaspt_BR
dc.subject.keywordtoxinas bacterianaspt_BR
dc.subject.keywordrecombinant antibodiespt_BR
dc.subject.keywordimmunoassaypt_BR
dc.subject.keywordprotein purificationpt_BR
dc.subject.keywordbacterial toxinspt_BR
dc.contributor.butantanPiazza, Roxane Maria Fontes|:Pesquisador:Docente PPGTOX|:Laboratório de Bacteriologiapt_BR
dc.contributor.butantanLuz, Daniela|:Aluno|:Programa de Pós-Graduação em Ciências – Toxinologia (PPGTox)pt_BR
dc.sponsorship.butantanFundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)pt_BR
dc.identifier.bvsccBR78.1pt_BR
dc.identifier.bvsdbIBProdpt_BR
dc.degree.levelDoutoradopt_BR
dc.degree.grantorInstituto Butantanpt_BR
dc.degree.localSão Paulopt_BR
dc.degree.programPrograma de Pós-graduação em Ciências - Toxinologia (PPGTox)pt_BR
dc.description.abstractptLinhagens de Escherichia coli produtoras da toxina de Shiga (STEC) causam colite hemorrágica e síndrome hemolítica urêmica pela produção da citotoxina de Shiga (Stx), uma toxina do tipo AB5, a subunidade B se liga ao receptor, e transloca a subunidade A ativa que inibe a síntese proteica por agir no rRNA levando à morte celular. O diagnóstico dessas linhagens não é realizado na rotina laboratorial de países em desenvolvimento e a terapia da intoxicação se baseia em tratar os sintomas, pois não há antídoto para a toxina. A obtenção de ferramentas para a detecção e terapia destas toxinas são de grande importância. Os anticorpos tem se mostrado moléculas excelentes como reagentes ligantes de alta afinidade à proteínas. Com o intuito de manter a homogeneidade e a especificidade dos anticorpos monoclonais, aliados ainda à produção em larga escala com baixo custo, a engenharia genética tem sido utilizada para obtenção de anticorpos recombinantes como os fragmentos variáveis de cadeia única e os fragmentos de ligação ao antígeno, que são fragmentos de anticorpos que possuem as regiões de reconhecimento ao antígeno. No presente trabalho foram obtidos e caracterizados dois tipos diferentes de fragmentos de anticorpos recombinantes (scFv e Fab), produzidos em bactérias, contra as toxinas Stx produzidas por isolados de STEC. Além disso, pela primeira vez, foi construído um fragmento monovalente humano (Fab), capaz de reconhecer e neutralizar as toxinas Stx. Estes fragmentos obtidos são promissores para seu uso como ferramentas tanto no diagnóstico como na terapia das intoxicações por STEC.pt_BR
item.fulltextCom Texto completo-
item.languageiso639-1Portuguese-
item.grantfulltextopen-
item.openairetypeDoctoral thesis-
crisitem.author.dept#PLACEHOLDER_PARENT_METADATA_VALUE#-
crisitem.author.orcid#PLACEHOLDER_PARENT_METADATA_VALUE#-
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