Diversidade das metaloproteinases presentes no veneno de Bothrops neuwiedi: identificação de SVMPs que induzem alterações na hemostasia

As metaloproteinases de venenos de serpentes (SVMPs) são enzimas abundantes em venenos de espécies da família Viperidae e responsáveis por grande parte dos sintomas do envenenamento. Sua ação está relacionada com a proteólise dos componentes da matriz extracelular, proteínas plasmáticas e também com hidrólise ou ligação a proteínas de superfície celular induzindo a ativação ou inibição da atividade das mesmas. Em estudos com serpentes do “Complexo Bothrops neuwiedi”, verificamos recentemente a diversidade dos transcritos de SVMPs produzidos após estímulo da glândula de veneno. Neste trabalho, o principal objetivo foi caracterizar as diferentes metaloproteinases presentes no veneno de Bothrops neuwiedi com ações na hemostasia. Inicialmente, confirmamos a presença de distintas SVMPs no veneno através de eletroforese bidimensional e cromatografia em coluna de fase reversa. Para a obtenção de frações enriquecidas com SVMPs e caracterização de suas atividades funcionais, o veneno foi fracionado em coluna de exclusão molecular, associado à coluna de troca aniônica e os pools resultantes testados quanto às atividades enzimática, hemorrágica, fibrinolítica, coagulante, reatividade com anticorpos anti-SVMPs e espectrometria de massas. Dessa forma, foi possível a identificação de seis pools contendo SVMPs, sendo quatro da classe P-III e dois da classe P-I. As SVMPs de classe P-III apresentaram atividades gelatinolítica e hemorrágica, destas, duas ainda apresentaram atividade fibrinolítica. As duas P-I foram apenas fibrinolíticas. Com relação à atividade coagulante, foram caracterizadas ao menos uma P-III ativadora de protrombina e uma P-III ativadora de fator X. Com isso concluímos que há grande variedade de SVMPs no veneno de Bothrops neuwiedi, as quais agem em diferentes mecanismos hemostáticos e contribuem para os sintomas causados nos envenenamentos por essa serpente.
Keywords
Bothrops;  enzimas proteolíticas;  coagulação;  metaloproteinases;  evolução de serpentes;  Bothrops;  proteolytic enzymes;  coagulation;  metalloproteinases;  snake evolution

Other Titles
Diversity of metalloproteinases present in the Bothrops neuwiedi venom: identification of SVMPs that cause alterations on hemostasis
metadata.dc.contributor
metadata.dc.description.sponsorship
Document type
Thesis
Advisor
Moura-da-Silva, Ana Maria
Level
Mestrado
Institution
Instituto Butantan
Place
São Paulo
Program
Programa de Pós-Graduação em Ciências – Toxinologia (PPGTOX)
Submission Date
2013
Metrics
Rights
Open Access
URI

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