Análise Bioquímica e Biológica da Secreção Cutânea do Anuro Dermatonotus muelleri

Venenos e secreções animais estão entre as mais ricas e complexas fontes de materiais biológicos, ou seja, novas moléculas com potencial aplicação biotecnológica ou mesmo farmacêuticas. Nesse sentido, moléculas isoladas da secreção da pele de anfíbios podem ser utilizadas como alternativas biotecnológicas destinadas aos novos medicamentos, como por exemplo, o combate de patógenos resistentes ou no desenvolvimento de novos produtos de utilidade industrial. Assim, esse projeto teve como objetivo identificar e caracterizar moléculas presentes na secreção cutânea de Dermatonotus muelleri (única espécie no gênero da família Microhylidae), por meio do isolamento e caracterização bioquímica. As secreções foram filtradas em membranas de corte de 10 kDa e o material retido foi analisado por SDS-PAGE e em seguida por uma abordagem proteômica. Também foi realizado um ensaio de zimografia. O filtrado de baixa massa foi fracionado por HPLC e analisado por espectrometria de massas e ressonância magnética nuclear. A eletroforese em gel apresentou conteúdo proteico de diversas massas moleculares. A análise proteômica encontrou correspondências relevantes para as proteínas distribuídas no gel de eletroforese, inclusive enzimas proteolíticas. Já os compostos filtrados na membrana de corte de 10kDa, demonstraram conter açúcares de acordo com a interpretação dos dados de RMN. Na análise por ESI-ITToF verificou-se moléculas de baixa massa molecular (<800 Da) ao longo de toda a amostra, sendo identificado o aminoácido triptofano entre elas. As frações filtradas foram ensaiadas para a atividade de antibiótica mas não foi observada inibição do crescimento bacteriano para estas frações, entretanto uma fração apresentou um significativo aumento do crescimento para Staphylococcus aureus. A análise proteômica foi pertinente, tendo demonstrando a presença de diversas proteínas relacionadas a biologia do animal e seu mecanismo de defesas. Do ponto de vista químico detectou-se um aminoácido que apresentou atividade de indução ao crescimento bacteriano, que pode estar relacionada a mecanismos alternativos à ausência atividade antimicrobiana nos compostos de baixa massa molecular.
Keywords
Venenos;  glândulas cutâneas;  Anura;  espectrometria de massas;  Dermatonotus muelleri;  Poisons;  skin glands;  mass spectrometry

Other Titles
Biochemistry and Biological Analysis of Skin Secretion of Anura Dermatonotus muelleri
metadata.dc.contributor
metadata.dc.description.sponsorship
Document type
Thesis
Advisor
Pimenta, Daniel Carvalho
Level
Mestrado
Institution
Instituto Butantan
Place
São Paulo
Program
Programa de Pós-Graduação em Ciências – Toxinologia (PPGTOX)
Submission Date
2015
Metrics
Rights
Open Access
URI

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