A biologia, as glândulas de veneno e a secreção cutânea da perereca da caatinga Corythomantis greeningi: um estudo integrativo

Full metadata record
DC FieldValueLanguage
dc.contributorPrograma de Pós-Graduação em Ciências – Toxinologia (PPGTox)pt_BR
dc.contributor.advisorAntoniazzi, Marta Mariapt_BR
dc.contributor.authorMendes, Vanessa Aparecidapt_BR
dc.date.accessioned2020-12-01T19:25:54Z-
dc.date.available2020-12-01T19:25:54Z-
dc.date.issued2015pt_BR
dc.date.submitted2015pt_BR
dc.identifier.citationMENDES, Vanessa Aparecida. A biologia, as glândulas de veneno e a secreção cutânea da perereca da caatinga Corythomantis greeningi: um estudo integrativo. 2015. 94 p. Dissertação (Mestrado em Ciências - Toxinologia) - Instituto Butantan, São Paulo, 2015.pt_BR
dc.identifier.citationMendes VA. A biologia, as glândulas de veneno e a secreção cutânea da perereca da caatinga Corythomantis greeningi: um estudo integrativo [Biology, poison glands and skin secretion of the tree frog of the caatinga Corythomantis greeningi: an integrative study] [Master's thesis]. São Paulo: Instituto Butantan; 2015. 94p. Portuguesept_BR
dc.identifier.urihttps://repositorio.butantan.gov.br/handle/butantan/3335-
dc.description.abstractCorythomantis greeningi (Cg) is an endemic anuran species of the Brazilian Caatinga, which has a co-ossified head with the skull (casque-head), used as cover when the animal enters backwards in small crevices, as a defense against predators and/or desiccation, in a behavior known as fragmosis. Although the skin of this species has already been relatively well studied by our group, its morphological details and the biochemical and pharmacological characteristics of its cutaneous secretion are not yet known. Thus, this work aims to fill this gap in the knowledge of this species. Dorsal, ventral and inguinal skin fragments were processed for histology and transmission (TEM) and scanning (SEM) electron microscopy. For biochemical studies the skin secretion was analyzed by SDS-PAGE, RP-HPLC and mass spectrometry. Crude secretion and its main fractions were tested for nociceptive and edema activities in mice, and for citotoxicity and antitumor effects in cell cultures of murine melanoma (B16F10) and murine fibroblasts (L929). The results show that the surface of the skin examined by SEM has a clear sexual dimorphism, with males presenting numerous cornified spicules in the dorsum, while the females have smoother skin in this region. The skin surface in all body regions presents epidermal micro-projections which are more prominent in the ventral and inguinal regions. These projections form a network of interconnecting channels that may facilitate the uptake of water. In both genders the skin surface of the inguinal region, has prominent hydrophilic warts associated with an extensive capillary network and the absence of calcified layer; together, these features may facilitate the uptake of the substrate water. Regarding the skin glands two types of acinar mucous glands and one type of venom syncytial gland were observed. This latter gland type is particularly abundant in the dorsal region, which is more susceptible to the attack of predators. The venom granules examined by TEM showed a complex structure comprised of several distinct compartments with different electron densities. The biochemical analyzes revealed that the secretion is plenty of protein in all molecular 17 mass bands mainly in the range 55-30 kDa. When analyzed by LC-MS it shows many low weight molecules (200 to 500 Da) with masses consistent with alkaloids and steroids. The crude secretion also showed to be positive for the presence of metallopeptidases and cysteine peptidase and negative for serine peptidases. The crude skin secretion was able to induce edema in all doses tested, most of them lasting 96 hours after injection, and was highly nociceptive in all tested doses. Tests with the isolated fractions showed that several of them have the ability to induce edema activity as either nociceptive, but with different intensity levels. In addition, we observed a greater inhibition of cell growth in the B16F10 lineage than in in L929 lineage, with the effective doses (IC50) of 4.6 mg/mL and 11.9 mg/mL, respectively. These results showed a possible antitumor activity in Cg skin secretion.pt_BR
dc.description.sponsorship(FAPESP) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulopt_BR
dc.description.sponsorship(CNPq) Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológicopt_BR
dc.description.sponsorship(CAPES) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superiorpt_BR
dc.format.extent94 p.pt_BR
dc.language.isoPortuguesept_BR
dc.rightsOpen accesspt_BR
dc.titleA biologia, as glândulas de veneno e a secreção cutânea da perereca da caatinga Corythomantis greeningi: um estudo integrativopt_BR
dc.title.alternativeBiology, poison glands and skin secretion of the tree frog of the caatinga Corythomantis greeningi: an integrative study.pt_BR
dc.typeMaster thesispt_BR
dc.subject.keywordAnurapt_BR
dc.subject.keywordcaatingapt_BR
dc.subject.keywordcasque-headpt_BR
dc.subject.keywordtegumentopt_BR
dc.subject.keywordmofologiapt_BR
dc.subject.keywordsecreção cutâneapt_BR
dc.subject.keywordatividades biológicaspt_BR
dc.subject.keywordcasque-headpt_BR
dc.subject.keywordintegumentpt_BR
dc.subject.keywordmorphologypt_BR
dc.subject.keywordskin secretionpt_BR
dc.subject.keywordbiological activitiespt_BR
dc.contributor.butantanAntoniazzi, Marta Maria|:Pesquisador:Docente PPGTOX|:Laboratório de Farmacologiapt_BR
dc.contributor.butantanMendes, Vanessa Aparecida|:Aluno|:Programa de Pós-Graduação em Ciências – Toxinologia (PPGTox)pt_BR
dc.sponsorship.butantan(FAPESP) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulopt_BR
dc.sponsorship.butantan(CNPq) Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológicopt_BR
dc.sponsorship.butantan(CAPES) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superiorpt_BR
dc.identifier.bvsccBR78.1pt_BR
dc.identifier.bvsdbIBProdpt_BR
dc.degree.levelMestradopt_BR
dc.degree.grantorInstituto Butantanpt_BR
dc.degree.localSão Paulopt_BR
dc.degree.programPrograma de Pós-graduação em Ciências - Toxinologia (PPGTox)pt_BR
dc.description.abstractptCorythomantis greeningi (Cg) é uma espécie de anuro endêmica da caatinga brasileira, que possui uma cabeça co-ossificada com o crânio ("casque head"), utilizada como tampa quando o animal penetra de ré em pequenas frestas, protegendo-se contra predadores e contra a dessecação, em um comportamento denominado fragmose. Apesar de sua pele já ter sido relativamente bem estudada por nosso grupo, detalhes morfológicos e as características bioquímicas e farmacológicas de sua secreção cutânea não são ainda conhecidos. Esse trabalho objetiva, assim, preencher essa lacuna. Para tanto, fragmentos de pele dorsal, ventral e inguinal foram processados para histologia e microscopia eletrônica de transmissão (MET) e varredura (MEV). Para os estudos bioquímicos a secreção cutânea foi analisada por SDS-PAGE, RP-HPLC e espectrometria de massas. A secreção bruta e suas principais frações foram testadas quanto às atividades nociceptiva e edematogênica em modelo murino, e quanto à citotoxicidade e ao efeito antitumoral em culturas celulares de melanoma murino (B16F10) e fibroblasto murino (L929). Os resultados mostram que a superfície da pele examinada ao MEV possui um claro dimorfismo sexual, onde o macho apresenta o dorso com inúmeras espículas córneas, enquanto a fêmea possui pele mais lisa. A superfície da pele de todas as regiões apresenta micro-projeções epidérmicas que são mais proeminentes nas regiões ventral e inguinal. Essas projeções formam uma rede de canais intercomunicantes que pode favorecer a captação de água. Em ambos os sexos a superfície da pele da região inguinal, apresenta verrugas hidrofílicas proeminentes, associadas a uma extensa rede capilar e à ausência de camada calcificada; em conjunto, essas características devem facilitar a captação de água do substrato. Em relação às glândulas cutâneas, foram observados dois tipos de glândulas acinosas mucosas, e um tipo de glândula de veneno sincicial, abundante principalmente na região dorsal, mais susceptível ao ataque de predadores. A forma dos grânulos de veneno examinados ao MET revelaram uma estrutura complexa, formada por 15 diversos compartimentos com eletrodensidades distintas. As análises bioquímicas revelaram abundância de proteínas em todas as faixas de massa molecular principalmente na faixa de 55 a 30 kDa. Já por LC-MS verificou-se abundância de moléculas de baixo peso (200 a 500 Da) compatíveis com massas de alcalóides e esteróides. Foi observada atividade enzimática positiva da secreção para metalopeptidases, bem como cisteínopeptidase e negativa para serinopeptidases, além de terem apresentado atividade hialuronidásica e fibrinogenolítica. A secreção cutânea foi capaz de induzir edema em todas as doses, perdurando na maioria delas até 96 horas após a injeção, além de mostrar-se altamente nociceptiva em todas as doses utilizadas. Os testes com as frações isoladas mostraram que várias delas possuem a capacidade de induzir tanto atividade edematogênica como nociceptiva, porém, com diferentes níveis de intensidade. Além disso, observamos que houve uma maior inibição do crescimento celular na linhagem B16F10 do que em L929, sendo as doses efetivas (IC50) 4,6 µg/mL e 11,9 µg/mL, respectivamente. Esses resultados evidenciam uma possível atividade antitumoral.pt_BR
item.grantfulltextopen-
item.languageiso639-1Portuguese-
item.fulltextCom Texto completo-
item.openairetypeMaster thesis-
crisitem.author.dept#PLACEHOLDER_PARENT_METADATA_VALUE#-
crisitem.author.orcid#PLACEHOLDER_PARENT_METADATA_VALUE#-
Appears in Collections:Dissertações do PPGTox


Files in This Item:

152.pdf
Size: 4.62 MB
Format: Adobe PDF
View/Open
Show simple item record

The access to the publications deposited in this repository respects the licenses from journals and publishers.