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Pesquisa de polimorfismos de genes da via de ativação do AhR em camundongos suscetíveis e resistentes à artrite experimental

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Campo DCValoridioma
dc.contributorCurso de Especialização em Biotecnologia para Saúde – Vacinas e Biofármacospt_BR
dc.contributorLab. Imunogenéticapt_BR
dc.contributor.advisorJensen, José Ricardopt_BR
dc.contributor.authorMaalouf, Renato Kandapt_BR
dc.date.accessioned2022-02-14T14:23:27Z-
dc.date.available2022-02-14T14:23:27Z-
dc.date.issued2022pt_BR
dc.date.submitted2022-01-28-
dc.identifier.urihttps://repositorio.butantan.gov.br/handle/butantan/4175-
dc.format.extent25 p.pt_BR
dc.language.isoPortuguesept_BR
dc.rightsOpen accesspt_BR
dc.titlePesquisa de polimorfismos de genes da via de ativação do AhR em camundongos suscetíveis e resistentes à artrite experimentalpt_BR
dc.typeAcademic monographpt_BR
dc.subject.keywordautoimunidadept_BR
dc.subject.keywordArntpt_BR
dc.subject.keywordAhrrpt_BR
dc.subject.keywordcamundongos selecionados geneticamentept_BR
dc.subject.keywordsequenciamento de cDNApt_BR
dc.identifier.citationabntMAALOUF, Renato Kanda. Pesquisa de polimorfismos de genes da via de ativação do AhR em camundongos suscetíveis e resistentes à artrite experimental. 2022. 25 p. Monografia (Trabalho de Conclusão de Curso) – Instituto Butantan, São Paulo, 2022pt_BR
dc.contributor.butantanMaalouf, Renato Kanda|:Aluno|:Curso de Especialização em Biotecnologia para Saúde – Vacinas e Biofármacospt_BR
dc.contributor.butantanJensen, José Ricardo|:Pesquisador|:Lab. Imunogenéticapt_BR
dc.identifier.bvsccBR78.1pt_BR
dc.identifier.bvsdbIBProdpt_BR
dc.degree.levelEspecializaçãopt_BR
dc.degree.grantorInstituto Butantanpt_BR
dc.degree.localSão Paulopt_BR
dc.degree.programEspecialização na Área da Saúdept_BR
dc.description.abstractptINTRODUÇÃO: A Artrite Reumatoide (RA), doença inflamatória crônica autoimune cujos eventos autoimunes primordiais não são totalmente conhecidos, envolve em sua suscetibilidade tanto um elemento genético quanto fatores ambientais. Um deles, a microbiota intestinal, pode modular significativamente o sistema imunológico através de produtos do metabolismo microbiano, muitos dos quais são ligantes do receptor de aril-hidrocarbonetos (AhR). O AhR é ativado por diversos ligantes, exógenos ou endógenos, os quais ativam programas transcricionais específicos, sendo uma ponte entre estímulos ambientais e fisiologia, e situando-se na multifatoriedade da Artrite Reumatoide. A ativação do AhR ocorre mediante interação com o translocador nuclear do AhR (ARNT), e pode ser reprimida através da competição com seu repressor (AhRR). Os genes Arnt e Ahrr estão contidos no intervalo de confiança de dois loci de suscetibilidade à artrite mapeados em camundongos selecionados fenotipicamente para alta (HIII) ou baixa (LIII) produção de anticorpos. Estas linhagens, quando submetidas ao modelo de artrite induzida por pristane (PIA), demonstram suscetibilidade extremamente divergente, possivelmente decorrente de suas genéticas distintas: completamente resistentes e suscetíveis, respectivamente. Elas também albergam microbiotas intestinais distintas, que podem ser parcialmente transferidas entre as linhagens, modulando os fenótipos de suscetibilidade à artrite. O envolvimento dos genes da via do AhR na progressão da artrite reumatoide ainda é pouco explorado, porém é pertinente investigar se os animais HIII e LIII apresentam alelos distintos destes genes, o que poderia sugerir um papel no desenvolvimento da doença, a ser avaliado em estudos posteriores. OBJETIVO: Investigar presença e distribuição de possíveis polimorfismos dos genes Arnt e Ahrr em camundongos HIII e LIII, e suas eventuais relevâncias na suscetibilidade à PIA. METODOLOGIA: RNA de camundongos das linhagens HIII e LIII foi convertido para cDNA por transcrição reversa. O material obtido foi amplificado por PCR com primers específicos para fragmentos dos genes alvo, e então submetido a eletroforese, com posterior purificação do DNA do gel ou do produto de PCR. Os produtos purificados foram então sequenciados. RESULTADOS: Para o Arnt, três de cinco fragmentos foram amplificados. Já para o Ahrr, apenas um de três fragmentos foi amplificado. As reações de sequenciamento realizadas indicaram uma divergência de uma base entre os animais HIII e LIII em um fragmento do Arnt, no entanto em uma sequência de baixa qualidade. DISCUSSÃO: Limitações intrínsecas aos genes, como baixa taxa de expressão e extensas UTRs 3’ de seus mRNAs, além de problemas técnicos que comprometeram o sequenciamento das extremidades dos fragmentos sequenciados, não permitiram concluir que a divergência encontrada seja um polimorfismo, e não um artefato de sequenciamento. CONCLUSÃO: A maior fragmentação da sequência a ser amplificada, ou ainda a clonagem de fragmentos do gene em plasmídeos para posterior sequenciamento poderiam superar os obstáculos encontrados no decorrer deste estudo, e indicam os próximos passos a serem seguidos na investigação do papel que a via do AhR exerce na suscetibilidade à PIA.pt_BR
dc.contributor.externalcountryBrazilpt_BR
item.openairetypeAcademic monograph-
item.grantfulltextopen-
item.languageiso639-1Portuguese-
item.fulltextCom Texto completo-
crisitem.author.dept#PLACEHOLDER_PARENT_METADATA_VALUE#-
crisitem.author.orcid#PLACEHOLDER_PARENT_METADATA_VALUE#-
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