Efeito da migalina sobre a resposta inflamatória provocada por monofosforil lipídio A (MFLA), agonista de TLR4, na linhagem Raw 264.7
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Academic monograph
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Portuguese
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Abstract
Macrophages are important cells of the immune system that play a role in innate and adaptive immune responses. They can differentiate into M1 and M2 subpopulations that display distinct functions in response to different stimuli. Toll-like receptors are fundamental in recognizing molecules associated with pathogens, as they activate macrophages and the innate immune response. The use of toll-like receptor activating molecules has been studied as a potential for new adjuvants, among these molecules Monophosphoryl lipid A (MPLA) stands out, a detoxified derivative of Lipid A, the main component of LPS (TLR4 agonist). Mygalin is a synthetic acylpolamine, analogous to the spermidine polyamine, originating from hemocytes of the spider
Acanthoscurria gomesiana. This molecule has proven microbicide activity and does not cause cytotoxicity in eukaryotic cells. Mygalin binds to E. coli LPS and regulates the overproduction of pro-inflammatory cytokines in response to LPS. MPLA is one of the detoxified LPS subunits and has been used as an adjuvant. We investigated, using in vitro assays, the immunomodulatory character of Mygalin on the inflammatory response induced by the activation of macrophages of the Raw 264.7 cell line in response to MPLA, to define the contribution of this subunit in the
suppression of the response to LPS. LPS and IFN-γ were used in parallel and possible mechanisms of this immune regulation were explored. We investigated, using in vitro assays, the immunomodulatory character of Mygalin on the inflammatory response induced by the activation of macrophages of the Raw 264.7 cell line in response to MPLA, to define the contribution of this subunit in the suppression of the response to LPS. LPS and IFN-γ were used in parallel and
possible mechanisms of this immune regulation were explored. Our results showed that Mygalin did not induce NO synthesis in macrophages stimulated with both MPLA and LPS and suppressed the synthesis of cytokine IL-6 and chemokine CCL2 in cells stimulated with these TLR4 agonists. The contribution of the arginase activation pathway in NO suppression was also evaluated using NOHA as an inhibitor, the direct action of this enzyme in reducing NO synthesis was not proven.
Abstract in Portuguese
Os macrófagos são importantes células do sistema imunológico que atuam na resposta imune inata e adaptativa. São capazes de se diferenciar em subpopulações M1 e M2 que apresentam funções distintas em resposta a diferentes estímulos. Os receptores Toll-like são fundamentais no reconhecimento das moléculas associadas aos patógenos, pois ativam os macrófagos e a resposta
imune inata. O uso de moléculas ativadoras de receptor toll-like tem sido estudado como potencial de novos adjuvantes, dentre essas moléculas destaca-se o Monofosforil lipídeo A (MFLA), um derivado desintoxicado do Lipídio A, o principal componente do LPS (agonista de TLR4). A Migalina é uma acilpoliamina sintética, análoga da poliamina espermidina, originária de hemócitos da aranha Acanthoscurria gomesiana. Esta molécula possui comprovada atividade microbicida e não provoca citotoxicidade nas células eucarióticas. A Migalina se liga ao LPS de
E. coli e regula o excesso de produção de citocinas pro-inflamatória em resposta ao LPS. O MFLA é uma das subunidades detoxificada do LPS, e vem sendo usado como adjuvante. Neste trabalho investigamos em ensaios in vitro o caráter imunomodulador da Migalina sobre a resposta inflamatória induzida pela ativação de macrófagos de linhagem celular Raw 264.7 em resposta ao MFLA, para definir a contribuição desta subunidade na supressão da resposta ao LPS. Foi usado
paralelamente LPS e IFN-γ e explorado possíveis mecanismos desta regulação imune. Nossos resultados mostraram que a Migalina não induziu a síntese de NO em macrófagos estimulados tanto com MFLA quanto LPS e suprimiu a síntese da citocina IL-6 e da quimiocina CCL2 em células estimuladas com estes agonistas de TLR4. Foi também avaliado a contribuição da via de ativação da arginase na supressão de NO usando o inibidor NOHA, não sendo comprovada a ação direta
desta enzima na redução da síntese de NO.
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https://repositorio.butantan.gov.br/handle/butantan/5069
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Issue Date
2023
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