Imunomodulação por frações de veneno de Bothrops alternatus em células mononucleares de sangue periférico

Os adjuvantes são utilizados para melhorar a imunogenicidade de antígenos de uma vacina, de forma a auxiliar a retenção dos mesmos no organismo e/ou melhorar sua rota de entrega. Atualmente, os adjuvantes com uso predominante e com licença de uso são os sais de alumínio. Os venenos de serpentes são fontes ricas de proteínas e moléculas com potenciais tóxicos, mas também farmacológicos. A Bothrops alternatus, popularmente conhecida como Urutu-Cruzeiro, é uma serpente peçonhenta da família Viperidae que está distribuída em países da América do Sul e no Sul e Sudeste do território brasileiro. A ação inflamatória do veneno botrópico é causada por conjuntos de frações com especificidades diversas e substâncias heterogêneas. Essas frações induzem a liberação de substâncias complexas do processo inflamatório. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito imunomodulador de frações de veneno de B. alternatus em culturas de células mononucleares do sangue periférico (PBMC) humano. Estudando as citocinas liberadas por essas células e isolando as frações que tiverem melhor função pró-inflamatória poderá ser possível avançar em estudos de possíveis novos adjuvantes. Foram realizados: Fracionamento do veneno por cromatografia de exclusão molecular; Dosagem protéica do veneno por método de BCA; Eletroforese em gel de poliacrilamida; Cultura de PBMC estimulada com as frações; Análise de viabilidade celular por ensaio de MTT; Dosagens de citocinas e quimiocinas por ensaio de CBA (Cytometric Bead Array). O fracionamento resultou em 10 frações, cujos perfis foram avaliados em gel de poliacrilamida 12,5%, corados com prata. Foram realizadas culturas de PBMC, que foram estimuladas com as frações de veneno em concentrações de 5 e 10 µg/mL. Com exceção da fração 3, as demais frações não apresentaram efeito citotóxico, avaliado pelo método de MTT. As frações 8, 9 e 10 induziram aumento da produção de TNF, IL-10, IL-6, IL-1β e IL-8 em relação aos controles negativos. Ao avançar com os estudos, talvez seja possível purificar tais frações em busca de uma molécula que possa ser utilizada como um possível novo adjuvante.