A biologia, as glândulas de veneno e a secreção cutânea da perereca da caatinga Corythomantis greeningi: um estudo integrativo

Corythomantis greeningi (Cg) é uma espécie de anuro endêmica da caatinga brasileira, que possui uma cabeça co-ossificada com o crânio ("casque head"), utilizada como tampa quando o animal penetra de ré em pequenas frestas, protegendo-se contra predadores e contra a dessecação, em um comportamento denominado fragmose. Apesar de sua pele já ter sido relativamente bem estudada por nosso grupo, detalhes morfológicos e as características bioquímicas e farmacológicas de sua secreção cutânea não são ainda conhecidos. Esse trabalho objetiva, assim, preencher essa lacuna. Para tanto, fragmentos de pele dorsal, ventral e inguinal foram processados para histologia e microscopia eletrônica de transmissão (MET) e varredura (MEV). Para os estudos bioquímicos a secreção cutânea foi analisada por SDS-PAGE, RP-HPLC e espectrometria de massas. A secreção bruta e suas principais frações foram testadas quanto às atividades nociceptiva e edematogênica em modelo murino, e quanto à citotoxicidade e ao efeito antitumoral em culturas celulares de melanoma murino (B16F10) e fibroblasto murino (L929). Os resultados mostram que a superfície da pele examinada ao MEV possui um claro dimorfismo sexual, onde o macho apresenta o dorso com inúmeras espículas córneas, enquanto a fêmea possui pele mais lisa. A superfície da pele de todas as regiões apresenta micro-projeções epidérmicas que são mais proeminentes nas regiões ventral e inguinal. Essas projeções formam uma rede de canais intercomunicantes que pode favorecer a captação de água. Em ambos os sexos a superfície da pele da região inguinal, apresenta verrugas hidrofílicas proeminentes, associadas a uma extensa rede capilar e à ausência de camada calcificada; em conjunto, essas características devem facilitar a captação de água do substrato. Em relação às glândulas cutâneas, foram observados dois tipos de glândulas acinosas mucosas, e um tipo de glândula de veneno sincicial, abundante principalmente na região dorsal, mais susceptível ao ataque de predadores. A forma dos grânulos de veneno examinados ao MET revelaram uma estrutura complexa, formada por 15 diversos compartimentos com eletrodensidades distintas. As análises bioquímicas revelaram abundância de proteínas em todas as faixas de massa molecular principalmente na faixa de 55 a 30 kDa. Já por LC-MS verificou-se abundância de moléculas de baixo peso (200 a 500 Da) compatíveis com massas de alcalóides e esteróides. Foi observada atividade enzimática positiva da secreção para metalopeptidases, bem como cisteínopeptidase e negativa para serinopeptidases, além de terem apresentado atividade hialuronidásica e fibrinogenolítica. A secreção cutânea foi capaz de induzir edema em todas as doses, perdurando na maioria delas até 96 horas após a injeção, além de mostrar-se altamente nociceptiva em todas as doses utilizadas. Os testes com as frações isoladas mostraram que várias delas possuem a capacidade de induzir tanto atividade edematogênica como nociceptiva, porém, com diferentes níveis de intensidade. Além disso, observamos que houve uma maior inibição do crescimento celular na linhagem B16F10 do que em L929, sendo as doses efetivas (IC50) 4,6 µg/mL e 11,9 µg/mL, respectivamente. Esses resultados evidenciam uma possível atividade antitumoral.
Keywords
Anura;  Caatinga;  casque-head;  tegumento;  mofologia;  secreção cutânea;  atividades biológicas;  casque-head;  integument;  morphology;  skin secretion;  biological activities

Other Titles
Biology, poison glands and skin secretion of the tree frog of the caatinga Corythomantis greeningi: an integrative study.
metadata.dc.contributor
metadata.dc.description.sponsorship
Document type
Thesis
Advisor
Antoniazzi, Marta Maria
Level
Mestrado
Institution
Instituto Butantan
Place
São Paulo
Program
Programa de Pós-Graduação em Ciências – Toxinologia (PPGTOX)
Submission Date
2015
Metrics
Rights
Open Access
URI

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