Expressão e purificação da proteína nucleocapsídica recombinante de SARS-CoV-2
Orientador
Afiliação Butantan
Tipo de documento
Academic monograph
Idioma
Portuguese
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Open access
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Resumo em inglês
Known as the Covid-19 Pandemic, caused by the SARS-Cov 2 virus, it became known as one of the great challenges of the 21st century and brought to industry and research the need to create defensive parameters and of rapid effectiveness for the biological study of possible threats to the health of the general population. The Sars-COV-2 Nucleocapsid protein, responsible for stabilizing the nucleocapsid, in addition to being involved in RNA synthesis and translation, and acting as an interferon antagonist and RNA interference suppressor, favoring viral replication, became the target of this study with the objective of creating parameters for its production in the laboratory in the form of recombinant protein. Aiming at high yield and good quality, through its expression
in competent bacteria Escherichia coli BL21(DE3) and the improvement in the steps of its creation, counting on sonication of the expressed bacteria, its purification and protein concentration. The present study reached the objectives for the production of this protein for the Laboratório de Imunoquímica of the Instituto Butantan, also being able to guide the production of this and other recombinant proteins that end up becoming of interest for study and research in search of the health of the population.
Resumo
Denominada como Pandemia do Covid-19, causada pelo vírus SARS-Cov 2, ficou conhecida como um dos grandes desafios do século XXI e trouxe à indústria e à pesquisa a necessidade de criar parâmetros defensivos e de rápida efetividade para o estudo biológico de possíveis ameaças à saúde da população em geral. A proteína Nucleocapsídica do Sars-COV-2, responsável por estabilizar o nucleocapsídeo, além de estar envolvida na síntese e tradução do RNA, e atuar como antagonista do interferon e supressor de interferência do RNA, favorecendo a replicação viral, se
tornou alvo deste estudo com o objetivo de criar parâmetros para a sua produção em laboratório em forma de proteína recombinante. Visando o alto rendimento e boa qualidade, através de sua expressão em bactéria competente Escherichia coli BL21(DE3) e a melhora nos passos de sua criação, contando com sonicação das bactérias expressas, sua purificação e concentração proteica. O presente estudo alcançou os objetivos para produção dessa proteína para o Laboratório de
Imunoquímica do Instituto Butantan, também sendo capaz de guiar a produção dessa
e de outras proteínas recombinantes que acabam se tornando de interesse para estudo e pesquisa em busca da saúde da população.
URL permanente para citação desta referência
https://repositorio.butantan.gov.br/handle/butantan/5055
Palavra-chave
Data de publicação
2023
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